超速離心：是囊泡分離的“金標準”，外泌體得率較高；但對實驗儀器要求特殊，耗時較長，無法實現高通量。
提取試劑盒：基于外泌體表達的特異性表面抗原，利用相應的抗體通過免疫親和分離，無須超速離心，耗時較短，可實現高通量；但相比超速離心，外泌體得率較低。
目前奧科醫學分離外泌體采用的是 Qiagen ExoEasy kit。
這種情況其實還是沒有成瘤。成瘤過程一般是細胞注射后有圓形小包，然后很快消失，再隆起(一般是組織液)，再變小變紅(血管生成)，最后腫瘤快速生長。因此沒有成瘤只是第二階段，建議調整一下細胞注射量、更換實驗鼠或添加一些促進細胞生長的因子試試。
有必要，至少需要兩次生物學重復，3次以上的生物學重復更好。2011年7月Hansen發表的文章表明生物學差異是基因自身表達的特性，與檢測技術的選擇以及數據處理的方式無關。如果不設生物學重復，高影響因子的雜志可能會因此而拒稿。
四個要點需要注意：一是要快，盡快洗凈或處理，處理后快速冷凍。細胞可以直接用Trizol裂解后冷凍，組織洗凈后，分成小塊直接冷凍；二是低溫，先浸入液氮，數小時后再放入-70或-80度超低溫冰箱緩凍為佳。超低溫冰箱可以保存數月至一年以上，-20度不宜久存；三是避免溫度波動，一臺經常開關門，溫度上下波動的-80度冰箱，可能冷凍效果還不如一天穩定在-40度的冰箱；四是推薦進口凍存管，標簽冷凍后容易破碎，不妨自己用記號筆進行標記。
組內差異大主要表現是組內老鼠有的長不出腫瘤組織，有的缺長得很大。原因很多，其一可能是接種懸液沒有搖勻，這種可能性較小；其二是可能存在一定的個體差異，鼠齡是一個很大的影響因素，建議控制好實驗條件，動物周齡控制在5-6周左右，體重均一，健康狀態一致。
優先建議做3次實驗重復，符合一般的文章對實驗數據的要求，不建議使用兩重復或只做一次，可能引起審稿人和編輯的質疑。
技術重復一般和上機重復非常類似，即上質譜的重復，即測試儀器的穩定性，判斷系統誤差等問題。而應用型的文章中，上機重復或技術重復一般沒有硬性規定，可以不做，如果做了當然最好，Editor就不會再此處找你的問題。
公司總部地址：廣州市科學城國際企業孵化器A座
實驗研發基地：廣州市科學城國際企業孵化器E座
聯系電話： 13922178748
郵箱地址：bd@aokemedical.com
Copyright@2016-2023 廣州奧科生物醫學科技有限公司 粵ICP備2022009287號
